JBRA Assist. Reprod. 2009;13(2):28-32
ARTIGO ORGINAL
doi: 10.5935/1518-0557.2010.13.2.06
Comparação Entre o Período de Abstinência Sexual e Diferentes Parâmetros Seminais em Pacientes de uma Clínica de Reprodução Assistida e de um Hospital de Porto Alegre - RS
Comparison Between Length of Sexual Abstinence and Semen Parameters in Patients of an Assisted Reproduction Center and a Hospital from Porto Alegre - RS
1Centro Universitário Feevale, Novo Hamburgo, Brasil
2Centro de Pesquisa e Reprodução Humana Nilo Frantz (CPRHNF), Porto Alegre, Brasil
3Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Porto Alegre, Brasil
4Hospital Fêmina (HF), Porto Alegre, Brasil
Instituições Executoras:
CPRHNF/ UFRGS/ FEEVALE/HF
RESUMO
Os parâmetros de morfologia, motilidade e concentração de espermatozóides determinam a qualidade de uma amostra seminal e alterações nestes parâmetros podem afetar a fertilidade do indivíduo. O presente trabalho teve como objetivo analisar diferentes parâmetros de qualidade seminal e compará-los com o período de abstinência sexual. Para isso, foi realizado um estudo retrospectivo de análise de prontuários de 33 pacientes. Os valores dos parâmetros seminais foram comparados em um mesmo paciente entre dois períodos: após uma primeira coleta com um período de abstinência curto (período A, 1-4 dias), e após uma segunda coleta com um período de abstinência maior (período B - máximo 5 dias de abstinência). Houve o acréscimo de pelo menos um dia de abstinência de diferença entre os dois períodos e não houve intersecção entre eles. Para a análise dos resultados foi utilizado um Teste T de Student para amostras pareadas. Os resultados mostraram um aumento significativo nos valores de concentração e motilidade no período mais longo (Concentração: período A=31,1±5,19; período B=44,846±7,738; P<0,01. Motilidade: período A=42,51±3,32; período B=53,27±3,15; P<0,001; média±erro padrão). Não foram verificadas diferenças significativas nos demais parâmetros analisados (Morfologia: período A=22,57±1,79; período B=25,36±2,004; P=0,059. Volume: período A=2,83±0,225; período B=3,32±0,369;. Vitalidade: período A= 58,83±2,98; período B=57,23±2,43; média±erro padrão, P>0,05). Um período de abstinência de até 5 dias parece ideal para que a maturidade espermática se complete, tornando os espermatozóides mais aptos à fertilização. Assim, o aumento no período de abstinência (até 5 dias) parece produzir uma melhora na qualidade seminal e pode ser um dado importante para casais que enfrentam problemas de fertilidade.
Palavras-chave: Abstinência sexual, Espermatogênese, Qualidade seminal, Fertilidade;
ABSTRACT
The parameters of morphology, motility and sperm concentration confer quality to a semen sample and changes in these parameters may affect male fertility. The present study aimed to compare different parameters of semen quality after two different sexual abstinence periods. The semen analysis of 33 patients were retrospectively analyzed. Semen parameters were compared for each patient in two different periods of sexual abstinence: period A short (1-4 days) and period B long (maximum of 5 days of abstinence). There was at least one more day of sexual abstinence between the two periods and there was not any overlapping between them. Results were analyzed by Student’s -T test for pared samples. Results showed a significant increase in sperm concentration and motility for the more prolonged period of sexual abstinence (Concentration: period A= 31,1±5,19; period B= 44,846±7,733; P=0,0026. Motility: period A=42,51±3,32; period B= 53,27±3,15; P=0,00038).No significant differences were detected for any of the other parameters analyzed (Morphology: period A= 22,57±1,79; period B=24,36±2,004; P=0,059; Volume: period A=2,83±0,225; period B=3,32±0,369; Viability: period A= 58,83±2,98; period B= 57,23±2,43; mean ± standard error, P>0,05). An abstinence period up to 5 days seems ideal for sperm maturation, possibly by making sperm more competent to fertilization. Thus, an increase of the sexual abstinence of up to 5 days seems to improve semen quality and my represent an important factor to consider when treating infertile couples.
Keywords: Sexual abstinence, Spermatogenesis, Semen quality, Fertility;
INTRODUÇÃO
Os parâmetros de morfologia, motilidade e concentração total de espermatozóides conferem a qualidade de uma amostra seminal e alterações nestes parâmetros podem afetar a fertilidade do indivíduo. Após a espermatogênese, os espermatozóides formados permanecem armazenados nos testículos e/ou nos epidídimos até o momento da ejaculação (Junqueira & Carneiro, 2008). A motilidade é induzida durante a ejaculação quando os espermatozóides se misturam com as secreções das glândulas acessórias (Lindholmer, 1974). Ela é o parâmetro mais importante no processo fertilizante (Donnelly et al., 1998). Se não houver ejaculação em um intervalo de até 5 dias a qualidade dos espermatozóides diminui (Bras et al., 1996). A Organização Mundial da Saúde (OMS) preconiza como período padrão de tempo de abstinência o intervalo entre 2 e 5 dias. Tal recomendação é de grande importância para aumentar as possibilidades de fecundação em casais que enfrentam problemas de fertilidade (OMS1999).
Sauer e colaboradores (1988), realizaram um estudo com o sêmen de 10 indivíduos férteis com períodos de abstinência de 12 horas, 1, 3 e 5 dias e observaram uma correlação positiva entre concentração, volume e o aumento do período de abstinência. Entretanto a motilidade espermática não foi afetada pelo período de abstinência. Por outro lado, a motilidade progressiva é um parâmetro que sofre redução se a abstinência for muito longa, como 10 dias (Magnus et al., 1991).
A análise de outros períodos de abstinência (24 horas e 4 dias), também mostrou um aumento do volume, da concentração e da motilidade no período mais longo (Matilsky et al., 1993).
Outro parâmetro que está relacionado à abstinência é a fragmentação do DNA. A analise dos parâmetros seminais e de fragmentações do DNA em espermatozóides de 11 homens que mantiveram períodos de abstinência de 1, 3, 5 ou 8 dias, mais uma vez demonstrou o aumento da concentração e do volume com o aumento do período de abstinência. A motilidade, o pH e a vitalidade ficaram inalterados.e não foram detectadas alterações significativas na fragmentação de DNA relacionadas ao aumento do período de abstinência (Jonge et al., 2004).
A fragmentação do DNA é um parâmetro inversamente correlacionado à qualidade seminal. O aumento da fragmentação do DNA está comumente associado a populações que apresentam diminuição da morfologia normal, da motilidade e da concentração de espermatozóides (Muratori et al., 2008).
Visto que poucos estudos dessa natureza têm sido realizados no Brasil, o presente trabalho teve como objetivo comparar diferentes parâmetros de qualidade seminal e relacioná-los com o período de abstinência sexual em indivíduos da cidade de Porto Alegre, RS.
MÉTODOS
O presente trabalho compreende estudo retrospectivo de análise de prontuários de 15 pacientes da Clínica de Pesquisa e Reprodução Assistida Nilo Frantz (do período de 2000 a 2008) e de 18 pacientes do Hospital Fêmina (do período de 2007 a 2008), ambos na cidade de Porto Alegre, RS. Os parâmetros de qualidade seminal foram comparados em um mesmo paciente entre o período de abstinência A (curto, de 1 a 4 dias) onde foi realizada a primeira coleta para o espermocitograma e o período de abstinência B (longo, de 2 a 5 dias) no qual foi realizada a segunda coleta. Houve o acréscimo de pelo menos um dia de abstinência de diferença entre os dois períodos, não havendo intersecção entre eles. As análises foram realizadas pela mesma analista em ambos os locais, utilizando a mesma metodologia sugerida pela OMS (1999). As análises consistiram de observações microscópicas das amostras coletadas, utilizando-se a Câmara de Makler® (Fertility Makler), para a contagem dos espermatozóides (concentração/ml) e a análise da motilidade. A motilidade dos espermatozóides foi classificada em A (direcionais rápidos), B (direcionais lentos), C (não direcionais) e D (imóveis). As amostras foram coradas com o kit Instant Prov, (Newprov/Brasil) para a avaliação da morfologia da cabeça, da peça intermediária ou da cauda. A medição do volume foi realizada utilizando-se um tubo cônico graduado.
Os prontuários contendo os resultados dos espermocitogramas que puderam ser analisados deveriam conter todas as informações sobre o espermocitograma tais como volume, concentração, motilidade, morfologia e vitalidade. A idade média dos pacientes foi de 34 anos e o período médio entre as coletas foi de 83 dias. O índice de normalidade seminal (NMS) das amostras foi calculado a partir do cálculo descrito por Jensen et al (2004): volume X concentração X % de espermatozóides móveis rápidos e direcionais (tipos A e B) X % de morfologia normal. Este índice representa o número total de espermatozóides normais com motilidade normal para cada amostra seminal. A média dos valores totais encontrados nos espermocitogramas é apresentada na Tabela 1.
Tabela 1. Médias dos valores dos espermocitogramas
A normalidade das amostras foi testada pelo método de Kolmogorov-Smirnov. A análise estatística foi realizada através do Teste T de Student para amostras pareadas (período longo versus período curto do mesmo paciente). Os dados são apresentados como média ± erro padrão com um nível de significância de 0,05.
Foram analisados 90 prontuários. O critério para exclusão dos espermocitogramas foi a falta de apresentação de alguma das informações necessárias para a análise ser realizada. Também foram excluídos os prontuários de pacientes que realizaram as duas coletas com o mesmo período de abstinência. Foram selecionados para este estudo 76 prontuários, sendo que 10 destes apresentaram períodos de abstinência maiores do que 5 dias.
RESULTADOS
A análise dos espermocitogramas mostrou um aumento significativo nos valores de concentração (período A=31,1 ± 5,19; período B=44,846 ± 7,738; P<0,01) e motilidade (período A=42,51 ± 3,32; período B=53,27 ± 3,15; P<0,001), com o aumento do período de abstinência sexual (Figuras 1 e 2. Os valores de morfologia normal (período A=22,57 ± 1,79; período B=25,36 ± 2,004; P=0,059), volume (período A=2,83ml ± 0,225; período B=3,32ml ± 0,369; P>0,05) e vitalidade (período A= 58,83 ± 2,98; período B=57,23 ± 2,43; P>0,05) não apresentaram alterações estatisticamente significativas ( Figuras 3, 4 e 5, respectivamente).
Figura 1. Média das concentrações de espermatozóides (concentração - milhões/ml) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto); Período B (longo). Foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (Teste T,*P<0,05). O número amostral foi de 33 para cada ponto.
Figura 2. Motilidade espermática (%) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto); Período B* (longo). Foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (Teste T,*P<0,05). O número amostral foi de 33 para cada ponto.
Figura 3. Morfologia espermática normal (%) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto); Período B (longo). Não foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (Teste T, P>0,05). O número amostral foi de 33 para cada ponto.
Figura 4. Volume seminal (mL) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto); Período B (longo). Não foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (Teste T, P>0,05). O número amostral foi de 33 para cada ponto.
Figura 5. Vitalidade (%) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto); Período B (longo). Não foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (Teste T, P>0,05). O número amostral foi de 33 para cada ponto.
Cinco pacientes que realizaram as coletas com um período de abstinência maior do que 5 dias, não foram incluídos nos resultados descritos acima. Entretanto, a análise dos espermocitogramas destes pacientes mostrou que existe uma redução do NMS com o aumento do período de abstinência (Figura 6). Observou-se, portanto, uma tendência para diminuição do NMS após 5 dias de abstinência.
Figura 6. Índice de Normalidade Seminal (NMS x 106) em dois períodos de abstinência sexual. Período A (curto - barras brancas); Período B (longo - barras hachuradas). Observa-se uma diminuição do NMS em relação ao aumento do período de abstinência para cada um dos pacientes analisados.
*A: 4 e 10 dias de abstinência;
*B: 3 e 6 dias ;
*C: 5 e 7 dias ;
*D: 5 e 10 dias;
*E: 4 e 6 dias;
DISCUSSÃO
O estudo permitiu a observação de que o aumento do período de abstinência até 5 dias ocasiona uma melhora significativa em relação à motilidade e à concentração de espermatozóides. A morfologia, o volume, e a vitalidade não apresentaram diferenças significativas em relação aos dois períodos.
Os espermatozóides são formados nos túbulos seminíferos e em seguida percorrem o epidídimo. A barreira hematotesticular permite que o sangue entre em contato com o epidídimo para que haja uma troca de nutrientes e íons, permitindo a ocorrência da primeira fase da maturação dos espermatozóides. Após a passagem pelo epidídimo os espermatozóides seguem para o canal deferente onde cerca de 60% dos mesmos são armazenados. No momento da ejaculação as vesículas seminais secretam no ducto ejaculatório substâncias nutritivas contendo frutose, ácido cítrico, prostaglandinas e fibrinogênio. A próstata secreta um líquido que contem cálcio, zinco, fosfato e antígeno específico da próstata (PSA), neutralizando a acidez dos outros líquidos seminais e conferindo um caráter alcalino ao sêmen final. Essa é a última fase de maturação dos espermatozóides (Guyton & Hall, 2006).
Nossos resultados mostrando a melhora da motilidade com o aumento do período de abstinência estão de acordo com outros estudos que indicam que múltiplas ejaculações diminuem as reservas testiculares. Assim períodos mais curtos de abstinência estão associados a baixas concentrações das substâncias secretadas pelas glândulas acessórias como o zinco (próstata) e α-glucosidase neutra (NAG - epidídimo) (Cooper et al., 1993). A NAG secretada está diretamente correlacionada com a motilidade do espermatozóide, pois otimiza os níveis energéticos dessas células (Fouri et al., 1991; Elzanaty et al., 2002). O zinco é outro fator importante, pois regula a atividade proteolítica do PSA no plasma seminal. Estudos indicam que o PSA está envolvido com a degradação da proteína responsável pela formação do coágulo do sêmen (Robert & Gagnon, 1996) e foi também correlacionado com a motilidade (Elzanaty et al., 2005).
A frutose é o principal substrato energético utilizado pelo espermatozóide (Mann, 1964). A diminuição do conteúdo de frutose no sêmen de pacientes com curto período de abstinência já foi previamente evidenciada (Cooper et al., 1993).
Assim, os resultados estão de acordo com a hipótese de que o aumento do período de abstinência provoca um concomitante aumento da quantidade de espermatozóides formados, aumentando a concentração espermática por mL de sêmen.
Entretanto, o aumento da abstinência por um período maior do que 5 dias está relacionado à reabsorção dos espermatozóides pelo epidídimo e a uma diminuição da motilidade dos mesmos (Bras et al., 1996). A diminuição da motilidade pode estar relacionada ao aumento da porcentagem de defeitos encontrados na cauda (Blackwell & Zaneveld 1992; Pellestor et al., 1994). A motilidade também depende da morfologia dos espermatozóides (Bedford, 1979). Não foi encontrado no presente trabalho aumento de defeitos na cauda, apenas uma diminuição do NMS. Entretanto, se cada variável usada para o cálculo do NMS for isolada, verifica-se que o parâmetro que sofreu maior alteração com o aumento do período de abstinência sexual foi a motilidade rápida e progressiva dos espermatozóides.
CONCLUSÃO
A maturação final dos espermatozóides livres no epidídimo e no canal deferente depende de fatores nutricionais e hormonais presentes no lúmen destas estruturas. Um período de abstinência de alguns dias parece ser benéfico para que a maturidade se complete, tornando os espermatozóides mais aptos à fertilização. Observamos que a motilidade e a concentração foram os parâmetros mais afetados com o aumento do período de abstinência sexual, possivelmente uma conseqüência da exposição mais prolongada às substâncias secretadas pelas glândulas acessórias. Assim, o aumento do período de abstinência (até 5 dias) produz uma melhoria na qualidade seminal do paciente. Os efeitos de períodos de abstinência maiores do que 5 dias precisam ser estudados em maior escala para serem conclusivos.
Referências Bibliográficas
Bedford JM. Evaluation of the sperm maturation and sperm storage functions of the epididymis. In Fawcett DW and Bedford JM (eds), The Spermatozoon. Urban and Schwarzenberg, Baltimore, pp. 7-21. 1979.