JBRA Assist. Reprod. 2000;04(01):45-46
RELATO DE CASO

doi: 10.5935/1518-0557.2000.4.1.09

Gravidez após uso de FSH recombinante e sêmen congelado em programa de ICSI

Pregnancy achieved after use of recombinant FSH and cryopreserved male partner sperm in an ICSI protocol

C.M. Oliveira Filho, A. J. O. Falleiros, F. J. Lopes, A. C. C. Franco, E. Soares

Correspondência para:
Clinimater
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Resumo
Descrever o tratamento de um casal infértil com a associação de FSH recombinante, injeção intracitoplasmática de espermatozóide (ICSI) e sêmen criopreservado do marido. O esquema de indução seguiu o protocolo longo com bloqueio hipofisário prévio usando de acetato de leuprolide (LUPRON) seguido de estímulo ovariano com FSH recombinante (Conal F). Os oócitos obtidos foram fertilizados pela técnica de ICSIcom sêmen congelado do marido. A gravidez foi obtida no 3° ciclo de tratamento. Um bebê saudável, do sexo masculino, nasceu parto cirúrgico em março de 1998. Embora o número de óocitos obtidos apos estimulação ovariana com FSH recombinante tenha sido superioraos anteriormente usados, o sucesso no tratamento do casal. com a obtenção da gravidez, mostrou a viabilidade da associação FSH rec., ICSI e sêmen criopreservado do marido.

Unitermos: FSH rec., ICSI, sêmen criopreservado, gravidez

Abstract
The main purpose of this paper is to describe the treatment ofan infertile couple by the association of recombinant FSH (rec-FSH), intracitoplasmatic sperm injection technique (ICSI) and cryopreserved male partner semen. Patient was ovarian stimulated with rec- FSH (Gonal F) after a previous pituitary desensibilisation with Lupron; ICSI was performed with cryopreserved male partner semen. Pregnancy was obtained at the third cycle. A healthy baby boy was bom by surgical means in march 1998. The succeeded treatrnent of the couple showed the feasibility of the association of rec- FSH, ICSI and cyopreserved semen and that clinics must be read to use available state of the ART resource.

Keywords: rec-FSH, ICSI cryopreserved male partner semen, achieved pregnancy

Introdução
As técnicas de reprodução assistida vêm sendo amplamente aplicadas desde o nascimento do primeiro "bebê de proveta", relatado por Steptoe e Edwards, 1978.
Por mais de uma década a técnica de fertilização "in vitro" foi a última esperança dos casais inférteis. Porém com a introdução da injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) em 1992. Palermo e col., marcaram o ínicio de uma nova era de tratamento para casais com infertilidade por fator masculino.
Paralelamente às técnicas de fertilização assistida há também a busca por medicamentos mais eficientes para estimular a poliovulação. O avanço mais recente nessa área é o lançamento no mercado de FSH recombinante (Derroy et. al., 1992). Diferente dos demais obtidos a partir da purificação de urina, este hormônio é produzido por engenharia genética, a partir de DNA recombinante, levando àuma maiorpurezae melhor recrutamento folicular (Bergh e col., 1997).
Este trabalho relata o sucesso na obtenção de gravidez com uso de FSH rec (Gonal F), sêmen criopreservado do marido e ICSI

Descrição do caso
O casal RAUC e RLOC procurou nossa clinica em setembro de 1996 com queixa de infertilidade há 3 anos, ela com 30 anos ele com 24.
Pelos exames de rotina constatou-se que a paciente tinha anovulação e apresentava dores pélvicas; os demais exames eram normais. Por laparoscopia diagnosticou-se endometriose à esquerda e devido ao grau de comprometimento dos anexos, foi feita anexectomia. Nos três meses subsequentes a paciente tomou uma ampola de Zoladex mensal (goserelina 3.6 mg - Zeneca).
Embora o primeiro espermograma do marido realizado em nossa clínica mostrasse uma concentração de 30 milhões/ml sendo 52% em progressão (A+B), os seguintes evidenciaram uma tendência a queda desses valores. Optou-se pelo congelamento de algumas amostras devido à perspectiva de volta ao Japão, onde residem. O protocolo de congelamento usado foi o mesmo descrito por Lucena, 1990.
Foram realizados dois ciclos de ICSI onde a paciente demonstrou ser má respondedora e não se obteve gravidez. Visando melhorar o recrutamento folicular, a paciente foi orientada a usar FSH recombinante (Gonal F - Serono) 225 UI/dia no seu 3° ciclo de ICSI em julho de 1997, com bloqueio hipofisário prévio com análogo de GnRH (Lupron - Abbott).
No 8° dia de estímulo ovário direito apresentava os seguintes diâmetros foliculares: 21-18-18-18-11 mm, quando foram administradas 10.00 UI de hCG (Profasi - Serono). Trinta e seis horas após foram aspirados apenas 7 oócitos que se mostraram em MII após a remoção do cumulus. Descongelou-se um palheta de 0.5 ml de sêmen que apresentou a concentração de 12 milhões de espermatozóides móveis (com motilidade A+B). Após o preparo através de gradiente descontínuo com Percoll (Pharmacia), obteve-se uma concentração de 2 milhões de espermatozóides móveis. O procedimento de injeção foi realizado 5 horas após a aspiração utilizando-se microscópio Nikon Diaphot 100, micromanipuladores Narishige e micropipetas Cook em meio tamponado Gamete (Scandinavian). Os óocitos injetados foram lavados e colocados junto em placas contendo 1 ml de IVF 50 (Scandinavian) + 15% de soro matemo e cobertas com óleo mineral (Sigma). Três óocitos apresentam 2 pronúcleos (PN) 18 horas após a injeção e foram colocados em meio novo de cultura. No dia seguinte havia 2 embriões - um tipo IV (blastomeros regulares e ausência de fragmentação) e um tipo II - e um oócito em 2 PN que, por não ter evoluido, não foi transferido.
Devido ao histórico de dificuldade na transferência de embriões, optou-se por realiza-la com sedação. A paciente então foi sedada com propofol (Diprivan - Zeneca) e os dois embriões foram colocados em cateter TEFCAT (Cook) em mínima quantidade de IVF 50 + 15% soro (+- 50111). A transferência foi fácil e sem problemas neste ciclo. A manutenção da fase lútea foi feita com administração 1M de progesterona oleosa na dose de 100 mg/dia.
O teste para hCG urinário, realizado 15 dias após a transferência, evidenciou gravidez confirmada posteriormente pela presençade dois sacos gestacionais com batimentos cardíacos através de ultra-som transvaginal. A gestação desenvolveu-se bem até a 10ª semana de gravidez quando então um dos embriões parou de crescer, e posteriormente, foi reabsorvido.
Em março de 1998, a paciente deu à luz um bebê saudável, do sexo masculino, pesando 1880 g e 48 cm, através de parto cirúrgico.

Discussão
Este relato de caso mostrou que embora o FSH rec não tenha levado a um aumento no número de óocitos obtidos, a obtenção de gravidez mostrou a viabilidade da associação FSH rec., ICSI e sêmen criopreservado do marido. Aceitamos que o baixo número de óocitos nos três ciclos de tratamento deve-se a característica da paciente de ser má respondedora. O congelamento adequado do sêmen nos possibilitou, mesmo na ausência do marido, continuar o tratamento do casal e a técnica de ICSI complementou o tratamento superando o problemà de baixa concentração de espermatozóides.
Nosso "follow up" nestes dois anos mostra um perfeito desenvolvimento deste recém nascido tanto física quanto mentalmente. Comunicamos assim, uma gestação com o nascimento de um bebê obtido, após associação de FSH rec, ICSI e sêmen criopreservado

Referências
Bergh C., Howles C. M., Borg K., Hamberger L., Josefersson B., Nilsson L. and Wikland M. - Recombinant human follicle stirnulating hormone (r-hFSH;Gonal F) versus highly puriefied urinary FSH (Metrodin HP): results of a randomized comparative study in women undergoing assisted reproductive techniques. Hum. Reprod., 12: 2133, 1997.

Devroy P., Steirteghem Van A., Manaerts B., Coelingh Bennink H. - First singleton term birth after ovarian superovulation with FSHrec. Lancet 340: 1108-1109; 1992.

Lucena E. - Técnicas de congelación de semen humano. Rev. Iberoamer. Fertil., 5: 101-104, 1990.

Palermo G., Joris H., Devroy P. , Steirteghem Van A. - Pregnancies after intracitoplasmatic injection of a single spermatozooninto an oocyte. Lancet, 340: 17-181992.

Steptoe P. C. and Edwards R. G. - Birth after the reimplantation of a human embryo. Lancet 1 : 366, 1978.