JBRA Assist. Reprod. 2000;04(02):93-94
RELATO DE CASO
doi: 10.5935/1518-0557.2000.4.2.10
Viabilidade espermática pós criopreservação em ejaculação retrógrada
Sperm viability after cryopreservation on retrograde ejaculation
1I.R.H.-. Instituto de Reprodução Humana de BH/MG
1,2Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde da PUC/MG
Resumo
o diagnóstico da ejaculação retrógrada é realizado através da história do paciente e contirmada pela presença de espermatozóides na urina colhida pós-orgasmo. A criopreservação de espermatozóides originados de fração da urina, reduz consideravelmente a quálidade seminal. Aparentemente estas alterações são compatíveis com as observadas na criopreservação de espermatozóides do ejaculado, desde que o material da urina seja coletado após a ejaculação. Por outro lado, a técnica de congelamento não deve ser usada de maneira rotineira em pacientes com ejaculação retrógrada, já que se o material obtido for de má qualidade, o processo de criopreservação tendo a acentuar as alterações. A conduta tomou-se uma alternativa válida para pacientes antes de serem submetidos a outras intervenções. Neste trabalho, os autores descrevem um método não invasivo de obtenção de espermatozóides na urina pós-orgasmo.
Unitermos: espermatozóide, criopreseryação, ejaculação retrógrada
Abstract
The diagnosis of retrograde ejaculation is made from the patient history and confirmed by finding sperm in the urine after masturbation. The cryopreservation of sperm originated from the post-ejaculation urinary fraction, reduces considerably the quality ofthe seminal parameter. Apparently these alterations are compatible with the ones observed in the standard seminal cryopreservation, that is if the material from the bladder is collected just after the ejaculation. On the other hand, the freezing technique should not be used in a routine manner with patients that suffer of retrograde ejaculation since if the material obtained is a bad quality one, the freezing process tends to accentuate this side of the data. The present conduct becomes a valid alternative to patients before they are submitted to other kinds of interventions. In this brief communication, the authors describe a non invasive method of sperm collection in a case of a retrograde ejaculation, being these sperm there after successfully cryopreserved.
Key words: sperm, cryopreservation, retrograde ejaculation
Introdução
A ejaculação retrógrada é uma causa incomum de infertilidade masculina com incidência ao redor de 0,3% (Yavetz et al., 1994). É definida como a condução total ou parcial do ejaculado para a bexiga urinária, criada por uma falha na contração do esfíncter interno durante a ejaculação. Sua etiologia é variada, podendo ser congênita ou adquirida, como a neuropatia diabética e ai njúria do cordão espinhal. Estas alterações, dentre outras, dificultam a obtenção de espermatozóides e consequente estabelecimento de uma fertilização. A recuperação de espermatozóides ao nível vesical, sua capacitação e utilização em reprodução assistida tem sido relatada (Jimenez et al., 1997).
O objetivo do trabalho é descrever um caso de criopreservação de espermatozóides encontrados na urina pós-orgasmo, através de técnica não invasiva em paciente submetido a ressecção prostática endoscópica aos 39 anos.
Descrição do Caso
Paciente de 47 anos, procurou o serviço com quadro de infertilidade primária há sete anos, com relato de ressecção transuretral da próstata feita aos 39 anos. Ao exame físico, apresentava bom estado geral, testículos e epidídimos de volume e consistência normais. Três análises de sêmen apresentaram azoospermia. Submetido, todavia, à pesquisa de espermatozóides na urina pós-orgasmo, foi constatada a presença de células da linhagem espermatogênica. Para tal, solicitou-se ao paciente que esvaziasse a bexiga através de micção normal. A amostra foi obtida após masturbação, e, observada a ausência de espermatozóides no ejaculado, o paciente realizou coleta de urina em frasco estéril de 100ml (Wheaton, EUA) contendo 18mL de meio RTF (lrvine Scientific, EUA). Na sequência, a amostra foi analisada e centrifugada por 10 minutos a 500g. O pellet restante foi ressuspendido em 1,0mL de meio, submetido a gradiente descontínuo Puresperm (Nidacon Laboratories AB, Suécia), com ajuste do pR para 7,4 com 1 ,3% de bicarbonato de sódio. Logo após, a amostra foi diluída volume a volume com o agente crioprotetor Test Yolk Buffer (Irvine Scientific, EUA) à temperatura ambiente. Para o congelamento propriamente dito, utilizou-se a técnica de criopreservação em nitrogênio líquido (Jimenez et al., 1997). No descongelamento ocorrido 28 meses após, a amostra foi retitada do nitrogênio e exposta á temperatura ambiente por 10 minutos. A seguir, foi incubada por 15 minutos a 370 C. Para a retirada do crioprotetor acrescentou-se 1,0mL de meio de cultura RTF com centrifugação de 1800g por 5 minutos. Ao pellet final foi adicionado 1,0mL de meio. Nova avaliação dos padrões seminais foi realizada com comparação dos parâmetros obtidos na coleta e após o descongelamento, constatando-se o êxito da técnica utilizada (Tabela I).
Tab. 1. Comparação dos valores seminais obtidos no meio/ urina e após descongelamento através de método não invasivo.
Discussão
A ejaculação retrógrada como causa de infertilidade apresenta várias etiologias. Provavelmente, a mais comum seja a ressecção prostática endoscópica resultando na abertura do colo vesical, e direcionamento do sêmen através desse caminho de menor resistência até a bexiga (Mourthé-Filho & Faria, 1999). Um dado relevante é a idade em que o paciente foi submetido a intervenção da próstata (39 anos), já que esta conduta é mais comum em indivíduos mais velhos. O diagnóstico é feito pela história pregressa, azoospermia anterógrada e pesquisa de espermatozóides na urina colhida pós-orgasmo. Além disso, observa-se que em muitos pacientes a sensação do mecanismo ejaculatório é mantida, apesar da emissão seminal estar ausente.
Duas técnicas tem sido usadas para obtenção de espermatozóides intravesicais. Na forma invasiva, a coleta é realizada através de sonda vesical. A não invasiva se baseia: na alcalinização com bicarbonato de sódio (Jimenez et al., 1997). No caso relatado, o paciente foi submetido a técnica não invasiva, porém sem a administração de solução de bicarbonato e micção natural em frasco contendo meio de cultura. Em razão do relato de ausência bilateral de tubas uterinas pela esposa do paciente, o casal foi submetido a técnica de injeção intracitoplasmática de espermatozóides. A interrupção do ciclo ocorreu por diversas vezes pelo fato da paciente ser má respondedora a estimulação hormonal. Por este motivo e dificuldade de coleta pelo paciente, a técnica de criopreservação de gametas foi realizada como salvo conduto à disponibilidade dos espermatozóides. O congelamento ocasionou diminuição de todos os parâmetros que avaliam o perfil do sêmen. O glicerol foi o crioprotetor escolhido, pelas suas características como crioprotetorpermeável (Gilmore et al., 1995). Estas alterações parecem serem compatíveis com as observadas na criopreservação seminal rotineira, desde que o material proveniente da bexiga seja processado de imediato (Morris etal., 1999).